Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
0,5Л и не более 2Л, считают, что испытуемый раствор в условиях испытания не содержит мешающих факторов. В иных случаях раствор оказывает влияние на результат испытания.
Если испытуемый препарат оказывает влияние на результат испытания в разведениях менее МДР, испытание на мешающие факторы повторяют с использованием больших разведений, но не превышающих МДР. Использование более чувствительного лизата позволяет применять большие разведения испытуемого препарата, и это может содействовать исключению мешающих факторов.
Мешающие факторы могут быть удалены соответствующей обработкой, например, путем фильтрации, нейтрализации, диализа или теплового воздействия. Для того, чтобы установить, что выбранный метод эффективно исключает мешающие факторы, не удаляя эндотоксины, испытания повторяют с использованием образца испытуемого препарата, к которому был добавлен стандартный образец эндотоксина и проведена выбранная процедура удаления мешающих факторов.
2. ПРЕДЕЛЬНОЕ ИСПЫТАНИЕ (МЕТОД А)
(i) Методика
Готовят растворы A, B, C и D в соответствии с Таблицей 2.6.14.-2 и выполняют испытание для этих растворов в соответствии с указаниями подраздела «1. Предварительные испытания. (i) Подтверждение чувствительности лизата, указанной на этикетке».
Таблица 2.6.14.-2
Раствор Концентрация эндотоксина/ Раствор, к кото Число повторностей
рому добавляют эндотоксин
А 0/Разбавленный испытуемый раствор 2
В 2Л/ Разбавленный испытуемый раствор 2
С 2Л/ Вода для ИБЭ 2
D 0/ Вода для ИБЭ 2
Растворы А и В (положительный контроль с препаратом) готовят в разведениях не выше МДР и обрабатывают в соответствии с указаниями подраздела «1. Предварительные испытания. (ii) Определение мешающих факторов». Растворы
В и С (положительные контроли) содержат стандарт эндотоксина в концентрации, соответствующей двукратной заявленной чувствительности. Раствор D (отрицательный контроль) представляет собой воду для ИБЭ.
(ii) Интерпретация
Результаты испытания считают достоверными, если положительные контрольные растворы В и С в обеих повторностях дают положительный результат, а раствор D - отрицательный результат.
Испытуемый препарат выдерживает испытание, если для раствора А в обеих повторностях получен отрицательный результат.
Если для раствора А в обеих повторностях получен положительный результат:
- если при этом испытуемый раствор разбавлен до МДР, он не выдерживает испытание,
- если степень разведения препарата менее МДР, испытание повторяют с использованием разведения, не превышающего МДР.
В случае, если для одной из повторностей раствора А получен положительный результат, а для другой - отрицательный, испытание повторяют. Испытуемый препарат выдерживает испытание, если в повторном эксперименте для раствора А в обеих повторностях получен отрицательный результат.
2. ПОЛУКОЛИЧЕСТВЕННОЕ ИСПЫТАНИЕ (МЕТОД В)
(i) Методика
С помощью данного испытания определяют количество бактериальных эндотоксинов путем титрования до конечной точки. Готовят растворы A, B, C и D в соответствии с Таблицей 2.6.14.-3 и выполняют испытание для этих растворов в соответствии с указаниями подраздела «1. Предварительные испытания. (i) Подтверждение заявленной чувствительности лизата».
Таблица 2.6.14.-3.
Рас Концентрация эндо Раство Фактор Исходная Число
твор токсина/ Раствор, к ритель разведе концентра повтор
которому добавляют ния ция эндо ностей
эндотоксин токсина
А 0 / Испытуемый рас- Вода для 1 - 2
твор ИБЭ 2 - 2
4 - 2
8 - 2
В 2А / Испытуемый рас 1 2А 2
твор
С 2А / Вода для ИБЭ Вода для 1 2А 2
ИБЭ 2 1А 2
4 0,5А 2
8 0,25А 2
D 0 / Вода для ИБЭ - - - 2
Раствор А - испытуемый раствор в разведении, не превышающем МДР, с которым проводилось определение мешающих факторов. Последующие разведения испытуемого раствора не должны превышать МДР. Используют воду для ИБЭ для получения двух рядов разведений в отношениях 1, 1/2, 1/4 и 1/8к разведению, с которым проводилось определение мешающих факторов. При необходимости могут быть использованы и другие разведения,
Раствор В - раствор А, содержащий стандарт эндотоксина в концентрации 2Л (положительный контроль с препаратом),
